Vi gör också PCR-experiment, varför är resultaten alltid så mycket sämre än andra?

Vi gör också PCR-experiment, varför är resultaten alltid så mycket sämre än andra?

I laboratoriet, titta på andra människors PCR, amplifieringseffektiviteten är hög, elektroforesremsan perfekt, och titta på sina egna, svåra att göra under en lång tid, känner att reaktionen är mycket bra, resultatet av ett falskt positivt test... Vad är problemet?

Jag tror att många av våra partners också har stött på olika problem.När vi stöter på en vägg i PCR-experiment kommer vi undermedvetet att analysera faktorerna inom reaktionssystemet, men vi bortser ofta från den viktiga påverkan av förbrukningsvaror i experiment.

Ditt PCR-resultat är fel, PCR-förbrukningsmaterial kan vara den väsentliga orsaken.Å ena sidan kommer mikrokontamination av förbrukningsvaror eller införande av inhibitorer att orsaka experimentell förorening;Å andra sidan kommer felaktigt val av förbrukningsvaror också göra att experimentresultaten blir lidande.

Problemet kommer igen.Det finns många typer av PCR-förbrukningsvaror, så hur väljer man rätt för att göra experimentet smidigare?Vilka är problemen att uppmärksamma?Oroa dig inte, idagI I kombination med många års erfarenhet av att reda ut vanliga problem med val av PCR-förbrukningsvaror hoppas jag kunna hjälpa dig.

 

F1: Varför är PCR-förbrukningsmaterial vanligtvis gjorda av PP-material?

Huida: Eftersom PCR-material vanligtvis är i direkt kontakt med reagenser eller prover, är polypropen (PP) material biologiskt inerta, fäster inte vid biomolekyler och har god kemisk tolerans och temperaturtolerans (kan autoklappas vid 121).° C, tål även temperaturförändringar under den termiska cykeln).

 

F2: Hur ska jag välja mellan olika storlekar av PCR-rör/plattor?

HUIDA: Syfte med urvalet: välj rätt produkter enligt de specifika experimentella kraven.Det mesta av storleken på PCR-röret kan uppfylla kraven för PCR-reaktion.På grundval av detta rekommenderas det att först välja lågvolymsröret.Eftersom reaktionsröret/plattan med låg volym har ett litet utrymme ovanför, förbättras värmeledningsförmågan och förångningen reduceras.Samtidigt är det nödvändigt att undvika att tillsätta för mycket eller för lite prover.För mycket kan leda till minskad värmeledningsförmåga, spill och korskontaminering, medan för lite kan leda till förlust av provavdunstning.

Specifikationer och volymer för vanliga reaktionsrör:

Enkelt/kombinerat rör: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,15 ml

96-brunnars platta: 0,2 ml, 0,15 ml

384-brunnars platta: 0,04ml

 

F3: När provkvantiteten är liten kommer jag att välja ett rör eller kombinerat rör, men varför har vissa platt lock och vissa har konvexa lock?

Huida: När provkvantiteten är liten är det enkla röret eller det kombinerade röret att föredra.Men när reaktionsvolymen är stor är det enda röret dominant och volymen kan nå 0,5 ml.Och platt lock och konvexa lock har alla fördelar, specifika kan hänvisa till följande information.

Enkelrör: 0,2 ml och 0,5 ml;Kan välja provkvantitet flexibelt.

Anslutningsslang: 0,2 ml eller 0,15 ml är valfritt;8 eller 12 rör är vanliga.

Platt hölje: kan ge exakt fluorescenssignalöverföring för qPCR;Lätt att skriva märken.

Konvext lock: kontakt med det heta locket på PCR-instrumentet för att minska deformationen av reaktionsröret som orsakas av tryck;Det kommer dock att påverka fluorescenssignalöverföringen och kan inte tillämpas på qPCR-experimentet.

 

F4: Varför har vissa PCR-plattor kjolar och andra inte?

Huida: I själva verket är kjolen på PCR-plattan designad för att bättre anpassa sig till automationsapplikationer, vilket ger stabilt stöd och mekanisk uthållighet för instrumentet, såväl som högre stabilitet under pipetteringsprocessen.

PCR-plattor är generellt uppdelade i icke-fåll, halvkant och helkant.

UtanPlatta: Lämplig för de flesta PCR-maskiner eller qPCR-maskiner, men inte för automationsapplikationer.Stabiliteten är inte hög under pipetteringsprocessen, så den måste användas med plattstöd.

Halv kjolkantplatta: kan anpassas till etikett- eller streckkodsapplikation, och automatisk applikation, och har god pipetteringsstabilitet.

Full kjolkantplatta: mycket lämplig för automatiserade experimentapplikationer, kan även anpassas till etiketten och appliceringen av streckkoden.Den har god mekanisk styrka, kan användas i bulgemodul PCR-instrument och har hög stabilitet i pipetteringsprocessen.

 

Q5 :För PCR-plattor, varför är hörnen och etiketterna inte riktigt desamma?

Huida: Det beror på effekten av hörnklippningen och markeringen.

Hörnskärning: Valet av hörnskärningsposition för PCR-plattan beror på kraven på lämpligt instrument för enkel positionering.

Identifiering: Alfanumeriska markörer på PCR-plattor hjälper till att identifiera individuella brunnar och provplatser.Generellt för den präglade färgen digitala logotypen eller graverad logotyp.För vissa automatiserade applikationer är tryckta och märkta reaktionsplattor bättre förseglade.

 

F6: Varför är vissa PCR-plattor konvexa medan andra är platta?Vilket är bättre?

Huida: Det som passar är bäst.Det finns två typer av vanliga PCR-plattor: platt pormarginal och hög pormarginal.

Platt hål marginal reaktionsplatta, lämplig för de flesta PCR-apparater.

Reaktionsplattor med stigande öppningskanter underlättar membrantätning och minskar risken för korskontaminering mellan proverna.

 

Huida har många års erfarenhet av produktion och bearbetning av PCR-produkter och industrins höga standarder.Produktlinjen är rik och klarar de allra flesta PCR-experimentella tillämpningar.Kom och välj rätt produkter för dina experimentella applikationer.

谷歌推广疫情产品PCR


Posttid: 2021-03-03

Skicka ditt meddelande till oss:

Skriv ditt meddelande här och skicka det till oss