Vi gör också PCR-experiment, varför är resultaten alltid så mycket sämre än andra?

Vi gör också PCR-experiment, varför är resultaten alltid så mycket sämre än andra?

I laboratoriet, titta på andras PCR, förstärkningseffektiviteten är hög, elektroforesremsan perfekt, och titta på deras egna, svåra att göra under lång tid, känner att reaktionen är mycket bra, resultatet av ett falskt positivt test ... problemet?

Jag tror att många av våra partners också har stött på olika problem. När vi stöter på en vägg i PCR-experiment kommer vi omedvetet att analysera faktorerna i reaktionssystemet, men vi ignorerar ofta det viktiga inflytandet från förbrukningsvaror i experiment.

Ditt PCR-resultat är fel, PCR-förbrukningsvarorna kan vara den viktigaste anledningen. Å ena sidan kommer mikroföroreningar av förbrukningsvaror eller införande av hämmare att orsaka experimentell förorening; Å andra sidan kommer fel val av förbrukningsvaror också att försöksresultaten lider.

Problemet kommer igen. Det finns många typer av PCR-förbrukningsvaror, så hur väljer man rätt för att göra experimentet smidigare? Vilka är problemen att vara uppmärksamma på? Oroa dig inte idagI i kombination med många års erfarenhet av att sortera urvalet av PCR-förbrukningsvaror vanliga problem hoppas jag kunna hjälpa dig.

 

F1: Varför är PCR-förbrukningsvaror vanligtvis tillverkade av PP-material?

Huida: Eftersom PCR-leveranser vanligtvis är i direktkontakt med reagens eller prover är polypropen (PP) -material biologiskt inerta, följer inte biomolekylär och har god kemisk tolerans och temperaturtolerans (kan autoklappas vid 121 ° C, tål också temperaturförändringar under den termiska cykeln).

 

F2: Hur ska jag välja mellan olika storlekar på PCR-rör / plattor?

HUIDA: Syftet med urvalet: välj rätt produkter enligt de specifika experimentkraven. Det mesta av PCR-rörets storlek kan uppfylla kraven för PCR-reaktion. På grundval av detta rekommenderas att välja röret med låg volym först. Eftersom reaktionsröret / plattan med låg volym har ett litet överliggande utrymme förbättras värmeledningsförmågan och indunstningen reduceras. Samtidigt är det nödvändigt att undvika att lägga till för mycket eller för lite prover. För mycket kan leda till minskad värmeledningsförmåga, spill och korskontaminering, medan för lite kan leda till provförångning.

Specifikationer och volymer för vanliga reaktionsrör:

Enkelt / kombinerat rör: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,15 ml

96-brunnars platta: 0,2 ml, 0,15 ml

384-brunnars platta: 0,04 ml

 

F3: När provmängden är liten kommer jag att välja ett rör eller kombinerat rör, men varför har vissa platt lock och andra har konvex lock?

Huida: När provmängden är liten föredras det enda röret eller det kombinerade röret. Men när reaktionsvolymen är stor är det enda röret dominerande och volymen kan nå 0,5 ml. Och platt lock och konvext lock har vardera fördelen, specifikt kan hänvisa till följande information.

Enstaka rör: 0,2 ml och 0,5 ml; Kan välja provkvantitet flexibelt.

Anslutningsrör: 0,2 ml eller 0,15 ml är valfritt; 8 eller 12 rör är vanliga.

Platt hölje: kan ge exakt fluorescenssignalöverföring för qPCR; Lätt att skriva märken.

Konvex lock: kontakt med PCR-instrumentets heta lock för att minska deformationen av reaktionsröret orsakat av tryck; Det kommer emellertid att påverka fluorescenssignalöverföringen och kan inte tillämpas på qPCR-experimentet.

 

F4: Varför har vissa PCR-plattor kjolar och andra inte?

Huida: I själva verket är PCR-plattans kjol utformad för att bättre anpassa sig till automatiseringsapplikationer, vilket ger stabilt stöd och mekanisk uthållighet för instrumentet, samt högre stabilitet under pipetteringsprocessen.

PCR-plattor är vanligtvis uppdelade i icke-hemline, halv-hemline och full-hemline.

Utan Platta: Lämplig för de flesta PCR-maskiner eller qPCR-maskiner, men inte för automatiseringsapplikationer. Stabiliteten är inte hög i pipetteringsprocessen, så den måste användas med plattstöd.

Halvkantskantplatta: kan anpassas till etikett- eller streckkodstillämpning och automatisk applicering och har bra pipetteringsstabilitet.

Helkantskantplatta: mycket lämplig för automatiserade experimentella applikationer, kan också anpassas till etiketten och appliceringen av streckkod. Den har god mekanisk hållfasthet, kan användas i PCR-instrument för utbuktningsmodul och har hög stabilitet vid pipettering.

 

Q5 :Varför är hörnen och etiketterna inte helt desamma för PCR-plattor?

Huida: Det beror på effekten av hörnskärningen och markeringen.

Hörnskärning: Valet av hörnskärningsläge för PCR-plattan beror på kraven på lämpligt instrument för enkel placering.

Identifiering: Alfanumeriska markörer på PCR-plattor hjälper till att identifiera enskilda brunnar och provplatser. Generellt för den präglade digitala logotypen eller graverade logotypen. För vissa automatiserade applikationer förseglas tryckta och markerade reaktionsplattor bättre.

 

F6: Varför är vissa PCR-plattor konvexa medan andra är platta? Vilket är bättre?

Huida: Det som passar bäst. Det finns två typer av vanliga PCR-plattor: platt pormarginal och hög pormarginal.

Reaktionsplatta med platt hål, lämplig för de flesta PCR-apparater.

Reaktionsplattor med stigande öppningskanter underlättar membrantätning och minskar risken för korskontaminering mellan proverna.

 

Huida har många års erfarenhet av produktion och bearbetning av PCR-produkter och höga standarder. Produktlinjen är rik och kan möta de allra flesta PCR-experimentella applikationer. Kom och välj rätt produkter för dina experimentella applikationer.

谷歌推广疫情产品PCR


Inläggstid: Jun-03-2021